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人白介素1β(IL

admin 2020-01-05 0
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特异性:

该测定法对Yandex细胞液用于检测人(人)IL1B的特异性高度敏感。

在高人(人)IL1 Bandanogues之间未观察到明显的交叉反应或干扰。

准确度:

批内准确性(一项测试的准确性):测试了3个已知CV浓度为8%的样品,并在板上评估了两次。

测试对测试的准确性(测试对测试的准确性):测试了三个已知浓度的样品,并通过CV%10%20测试进行了评估。

样品收集和储存:

血清:使用血清分离管(SST)在室温下于4°C过夜凝结样品2小时,然后以1000 xg离心15分钟。

立即口服消除人体并将样品存储在-20°C-80°C

避免反复冻融。

血浆:使用肝素抗凝剂EDTA收集血浆。

在1000 x gat2-8°C下离心15分钟,收集30分钟。

立即测试oraliquotand并在-20°Cor-80°C下采样。

避免反复冻融。

检测步骤:

使用前,将所有试剂和样品置于室温。

在开始测试之前,再次离心样品。

建议一式两份分析所有样品和标准品。

1)

准备上一节中指示的所有试剂,工作标准品和样品。

2)

再次查看测试设计表,以确定要使用的孔的数量以及袋子的剩余源和背衬粘合剂层,密封拉链,并将未使用的孔存储在4°C下。

3)

每孔添加100μl标准品和样品。

用附带的胶带覆盖。

在37°C下孵育2小时

分配板提供标准配准和分析样品。

4)

从每个孔中除去液体,请勿清洗。

5)

向每个孔中添加100μl生物素抗体(1x)。

用胶带覆盖。

在37°C下孵育1小时

(生物素抗体(1x)可能看起来不透明。

在室温下加热并混合直至溶液均匀。

)6。

用真空吸尘器清洗每口井地面的清洗液,不时重复清洗总共3次。

每次使用小瓶,多通道移液器,多分配器,水洗器和支撑架用洗涤缓冲液(200μl)彻底冲洗2分钟。彻底清除每种液体,性能良好

最后一次洗涤后,通过抽吸或倾析用缓冲液除去其余的洗涤液。

将板和插槽倒在干净的纸巾上。

7)

向每个孔中添加100μlHRP-抗生物素蛋白(1x)。

用新的粘合剂覆盖微量滴定板。

在37°C下孵育1小时

8)

重复步骤5进行真空/清洁过程。

9)

向每个孔中添加90μlTMBS底物。

在37°C下孵育15-30分钟

避光

10)

向每个孔中添加50μlStopSolution,然后将板固定或混合均匀。

11)

使用设置在450 nm的酶标仪在5分钟内确定每个孔的光密度。

如果可以进行波长校正,则设置为540 nm或570 nm。

从450 nm读数中减去570 nm处的540 nm读数。

这种减法对于印版上的光学缺陷是正确的。

未经校正直接在450 nm处获取的读数会更高,并且准确性可能会降低。

结果计算:

使用CurveExpert 1 Professional。

建议从网络上下载三个标准曲线。

显示并减去每个标准品重复测量的平均值和标准光密度的平均值。

通过使用可生成四参数逻辑曲线调整(PL)的计算机来减少数据来创建标准曲线。

或者,针对六边形轴上每个标准之前的轴浓度绘制介质或间隙,以创建标准曲线并在图形上的各点之间绘制最佳拟合。

可以通过针对OO注册表绘制I1B浓度记录来调整数据。

D.

此外,最佳拟合线可以通过回归分析确定。

此过程可提供准确且适当的数据拟合。


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